实验室胚胎培养,是试管中最神秘的步骤,精子和卵子在实验室汇合之后,稍加休息就会进入关键环节——受精。
受精可以说影响着整个胚胎培养的成功率,虽然有些技术能够帮助提高受精率,但是依然有些姐妹在这个阶段碰到了难题,比如:
发生多精子受精,只能遗憾终止…
原核数量不对,(0PN或者1PN)只能被迫养囊…
1PN/0PN养到了囊胚,要不要去移植?
如果你刚好有以上的问题,那这篇就要认真看咯!如果你现在还未进入试管流程,也可以提前了解一下,防患于未然,提高自己在试管中的胜算!
▍受精过程蕴含的生命密码
说起「受精」似乎很简单,精子和卵子相遇不就可以了?事实上,从卵子到受精卵,那可绝对是一个生命诞生初期充满神奇的质变过程!
要知道,如果没有受精,卵子会在24小时内凋亡(最佳受精时间是排卵后12小时),而精子的存活也超不过72小时。在历史的长河里,连沧海一粟都算不上。
然而,一旦它们结合形成了受精卵,就会开始从1个细胞裂变成2个、4个、8个,直到一点点发展成鲜活的生命!你看,受精才是新生命的起点!
如果把受精这个过程进一步拆解的话,会有以下5步:
精子和卵母细胞的接触与识别
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精子穿入卵子透明带
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卵母细胞被激活(排出第二极体)
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卵母细胞对精子的接受然后融合
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出现两个原核(pronuclei,PN)
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原核融合消失,升级成受精卵
在这个过程中,只有雄雌原核出现,才意味着受精完成,从两个生殖细胞正式合二为一,成为受精卵。这两个原核就是由精子和卵子各提供一个。少了不行,多了更不行!
而且原核出现的时机也很重要,要在精卵相遇之后的6-20小时以内出现。
▍为何会出现异常受精
如果受精结果显示异常,可能有以下这几种情况和原因:
1.多精子受精,原核数目过多
当受精之后,观察到有≥3PN时,就属于异常受精。临床上就会终止培养。
这类异常不仅会导致胚胎染色体异常,而且异常的纺锤体结构和数目可能导致异常的细胞分裂,从而产生高比例的复杂嵌合体胚胎。因此目前主流的做法就是终止培养。
简而言之,多PN的主要原因,是两个或以上的精子进入了卵子,也就是常说的多精子受精。
发生多精子受精的原因,目前的研究认为,可能是卵子细胞不够成熟或过于成熟、卵子的透明带异常、精子浓度过高、卵子第二极体滞留等原因所致。
2.原核数量少,或许还有一线生机
原核出现的时间是在6-20h以内,但是在临床上,除了运用timelapes系统全面检测外,更多地采用人为观察法,也就是在授精后16~20h之间会去观察精卵的原核情况。
通常看到两个原核(2PN)就认为是正常受精,但如果没看到原核(0PN)或者一个原核(1PN),那该咋办呢?或不会都是不正常,要丢弃呢?
那也不尽然!
因为,可能原核出现的时间过早或者过晚,导致错过了观察的时间。
因此碰到这种情况,大多不会去停止培养,而是做一个记录,继续培养,最终看它是否能够走到囊胚。走到囊胚的话,基本等同于正常的胚胎,但可不可以移植,小侠后面继续来说。
也有可能是异常的,那异常的原因有哪些呢?
两个原核,精子和卵子各提供一个。如果是0PN,可能是精子质量差,精子粘附和穿透机制的缺陷以及透明带受体缺乏等,引起精子穿透失败,导致卵母细胞未受精,也就是受精失败;除了精子因素外,0PN也可能是卵子未成熟或者卵子的染色体异常所致。
如果是1PN,可能是精子或卵子的原核时间出现不一致,也可能是仅有一方出现了原核,而另外一方异常没有原核,那此时也很难继续发育,或者后续发育了也会存在染色体的异常。
另外,当用了二代显微受精而出现1PN时,可能是操作时,授精针破坏了卵母细胞的纺锤体,导致第二极体排出障碍;卵母细胞激活障碍时,纺锤体及星状体缺陷等导致雌性原核形成障碍等原因。
所以有些生殖中心,在采用二代显微受精时,如果观察到1PN,可能会直接废弃,不再继续培养。
▍1PN/0PN养到囊胚,要不要移植?
上面我们说的是受精时常出现的异常原核的情况以及原因,可以看出原核数量≥3个的话,绝对异常,肯定不会再继续了;而那些原核数量少的,则有一线生机,可能是观察时机不合适所致。
因此,当观察到0PN/1PN时,继续培养走到了囊胚,是不是可以移植呢?为此小侠查阅了相关研究,希望能够给大家一些方向。
在第一个研究中,研究人员选取了787个试管周期,然后将周期内获得的卵子,根据情况进行受精培养到囊胚,以及进行染色体的筛查。最终的结果如下:
最终看到正常2PN的囊胚的形成率明显高于0PN/1PN;另外三代筛查的结果显示,OPN(2Pb)/1PN的囊胚染色体正常率的明显低于2PN囊胚,差异有统计学意义。也就是说能够到达囊胚的0PN/1PN的胚胎,是有机会活产并成为健康宝宝的。
同时小侠还检索到另一个研究文献,在这项研究中,涵盖了11588个女性生殖周期,研究冷冻1PN和0PN来源的单囊胚移植后的临床妊娠、活产率等。
最后的结果显示:通过一代受精获得的1PN的囊胚的妊娠率和活产率分别为37.5%和27.1% ,与2PN囊胚的妊娠率无显著差异;但0PN衍生囊胚的妊娠率明显降低。
另外在使用二代受精时,获得的0PN囊胚的妊娠率和活产率分别为45.7%和34.8%,与2PN来源囊胚无显著差异;但1PN来源囊胚的形成率明显低于2PN和0PN来源囊胚。
也就是说,1PN和0PN来源的囊胚均可用于胚胎移植;但是,在体外受精时,1PN的妊娠率和活产率较0PN更高;而在显微受精时则相反,0PN的会较高。
最后来给大家总结一下:
????优先移植正常原核数量的胚胎;
????在无正常胚胎的情况下,可以考虑移植0PN/1PN的囊胚;
????0PN和1PN做选择的话,考虑受精方式;
????在体外受精时,1PN优于0PN;显微受精时,0PN优于1PN。
关于那些异常受精的胚胎,要不要移植,移植哪个,你有答案了么?
如果你在受精或者试管过程中还有疑问,欢迎来找我聊一聊!
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